Techniki pipetowania
2011-04-29 14:03:00autor: Karolina Borowicz /PZ HTL S.A. Marzec 2011
Każda pipeta automatyczna działa na podobnej zasadzie. Naciskając przycisk pipetowania powodujemy ruch tłoka (tzw. nurnika) wewnątrz pipety. W przycisku pipetowania wyczuwalne są dwa progi (tzw. opory), które określają właściwe położnie nurnika podczas pobierania i wydawania cieczy. W przypadku pipet automatycznych stosuje się 2 techniki pipetowania: pipetowanie standardowe i pipetowanie rewersyjne.
Pipetowanie standardowe
Techniką pipetowania standardowego (prostego) pipetujemy wodę oraz wszystkie roztwory wodne np. bufory, rozcieńczone kwasy i zasady.
1. Załóż końcówkę
2. Pobierz ciecz. Wciśnij przycisk pipetowania do pierwszego oporu (A). Trzymając pipetę pionowo zanurz końcówkę w cieczy, którą chcesz pobrać. Powolnym, płynnym ruchem zwolnij przycisk pobierając ciecz. Odczekaj 1 sekundę zanim wyjmiesz końcówkę z cieczy (B).
3. Wydaj ciecz. Trzymając pipetę odchyloną od pionu (od 10 do 40 stopni) przyłóż koniec końcówki do ścianki naczynia. Powoli naciśnij przycisk do pierwszego oporu i wydaj ciecz (C). Po 1 sekundzie dociśnij przycisk do drugiego oporu (tzw. wydmuch), aby usunąć resztki cieczy z końcówki (D). Trzymając przycisk wciśnięty do końca wyjmij delikatnie końcówkę przesuwając ja po ściance naczynia. Zwolnij przycisk (E).
3. Zrzuć końcówkę. Naciśnij do oporu przycisk wyrzutnika i usuń brudną końcówkę z trzonu pipety.

Pipetowanie rewersyjne
Technikę pipetowania rewersyjnego stosuje się w przypadku pipetowania cieczy gęstych, lepkich, pieniących lub bardzo małych objętości. Polega ona na pobraniu próbki przy wciśniętym przycisku pipetowania od razu do drugiego oporu (pozycja wydmuchu), a następnie wydanie cieczy tylko do pierwszego oporu. W końcówce zostanie trochę cieczy, którą należy wydać z powrotem do naczynka wyjściowego lub usunąć razem z końcówką.

Karolina Borowicz /PZ HTL S.A.
Marzec 2011
Każda pipeta automatyczna działa na podobnej zasadzie. Naciskając przycisk pipetowania powodujemy ruch tłoka (tzw. nurnika) wewnątrz pipety. W przycisku pipetowania wyczuwalne są dwa progi (tzw. opory), które określają właściwe położnie nurnika podczas pobierania i wydawania cieczy. W przypadku pipet automatycznych stosuje się 2 techniki pipetowania: pipetowanie standardowe i pipetowanie rewersyjne.
Pipetowanie standardowe
Techniką pipetowania standardowego (prostego) pipetujemy wodę oraz wszystkie roztwory wodne np. bufory, rozcieńczone kwasy i zasady.
1. Załóż końcówkę
2. Pobierz ciecz. Wciśnij przycisk pipetowania do pierwszego oporu (A). Trzymając pipetę pionowo zanurz końcówkę w cieczy, którą chcesz pobrać. Powolnym, płynnym ruchem zwolnij przycisk pobierając ciecz. Odczekaj 1 sekundę zanim wyjmiesz końcówkę z cieczy (B).
3. Wydaj ciecz. Trzymając pipetę odchyloną od pionu (od 10 do 40 stopni) przyłóż koniec końcówki do ścianki naczynia. Powoli naciśnij przycisk do pierwszego oporu i wydaj ciecz (C). Po 1 sekundzie dociśnij przycisk do drugiego oporu (tzw. wydmuch), aby usunąć resztki cieczy z końcówki (D). Trzymając przycisk wciśnięty do końca wyjmij delikatnie końcówkę przesuwając ja po ściance naczynia. Zwolnij przycisk (E).
3. Zrzuć końcówkę. Naciśnij do oporu przycisk wyrzutnika i usuń brudną końcówkę z trzonu pipety.
-
BANKOWANIE BAKTERII W GLICEROLU
Bakterie bankuje się poprzez dodanie do świeżej hodowli bakterii w pożywce LB sterylnego glicerolu do stężenia ~ 15%. -
ELEKTROPORACJA KOMÓREK EUKARIOTYCZNTYCH
Elektroporacja to jedna z podstawowych metod wprowadzania genów do komórek. Wykorzystuje ona przejściowe (czasowe) uszkodzenie błony komórkowej pod wpływem przyłożonego... -
Zasady pobierania materiału klinicznego
Procedury przedlaboratoryjne wyznaczają rodzaj materiału, sposób jego pobierania, warunki przechowywania oraz transportu. -
POWIERZCHNIE WZROSTOWE NACZYŃ HODOWLANYCH
Do hodowli komórkowej używane są najczęściej butelki i płytki firm: CORNING, NUCLON, FALCON. -
TRANSFEKCJA Z LIPOFEKTYNĄ
Przygotowanie komórek do transfekcji. -
TRANSFEKCJA KOMÓREK – OGÓLNE WIADOMOŚCI
Istnieje szereg metod wprowadzania genów do komórek eukariotycznych. -
OZNACZANIE ILOŚCI ŻYWYCH KOMÓREK WYBARWIONYCH ROZTWOREM BŁĘKITU TRYPANU
Błękit trypanu barwi jedynie martwe komórki. -
LICZENIE KOMÓREK W KOMORZE BÜRKERA
Określenie ilości komórek w danej objętości medium lub płynów fizjologicznych jest niezbędne w późniejszych eksperymentach. -
PRZEPROWADZENIE TESTU KLONOGENNOŚCI (ANG. CLONOGENIC ASSAY)
Test ten jest przeprowadzany w celu porównania między sobą liczby komórek tworzących kolonie w różnych mediach, w przypadku różnych linii...













